Эффективность применения «Фирококсиба» в комплексной паллиативной терапии сарком мягких тканей у собак
Среди животных наиболее подвержены онкологической патологии мелкие домашние животные. По сравнению с другими видами животных у кошек и собак злокачественные опухоли встречаются намного чаще, оказываясь предпосылкой к летальному исходу.
Основными методами лечения злокачественных новообразований являются хирургическое иссечение, лучевая и химиотерапия (или комбинация этих мер). При невозможности проведения радикального лечения необходимо назначение паллиативной терапии, включающей применение препаратов группы алкилирующих антинеопластических средств в комбинации с группой нестероидных противовоспалительных препаратов. Актуальный вопрос — подбор препаратов группы нестероидных противовоспалительных средств с целью достижения максимального терапевтического эффекта и снижения риска возникновения побочных эффектов.
Канцерогенез — сложный многофакторный процесс, приводящий к возникновению злокачественных новообразований, хотя воспаление и является защитной реакцией организма на внедрение инфекционного агента, поступление антигена или физическое повреждение клеток, которая в норме устраняет возбудителя и восстанавливает физиологию тканей. Однако при хроническом течении процесса воспаление может в том числе привести к канцерогенезу за счет подавления апоптоза, пролиферации и развитию ангиогенеза.
Микроокружение злокачественной опухоли, богатое воспалительными клетками, факторами роста и агентами, способствующими повреждению ДНК, способствует устойчивой и усиленной пролиферации и выживанию клеток, тем самым повышая неопластический риск.
Циклооксигеназа-2 (ЦОГ-2) является ферментом, ответственным за воспалительный каскад, способствуя синтезу нескольких медиаторов воспаления, таких как простагландины и тромбоксан. Селективные ингибиторы ЦОГ-2 снижают уровень простациклина, антиагрегационного агента, однако не снижают уровень сосудосуживающих медиаторов, генерируемых ЦОГ-1.
Высокоселективные ингибиторы ЦОГ-2, известные как коксибы, представляют собой тип нестероидных противовоспалительных препаратов, которые напрямую воздействуют на ЦОГ-2, фермент, отвечающий за воспаление и боль, что способствует торможению роста неопластических клеток за счет противовоспалительного эффекта и влияния на микроокружение злокачественной опухоли. Ингибиторы ЦОГ-2 снижают воспаление и болевой синдром, а в сочетании с химиотерапевтическими препаратами, цитостатиками или таргетной терапией усиливают их противоопухолевую активность, снижая скорость и объем роста новообразований, приводя к частичной ремиссии, увеличению общей выживаемости и улучшению качества жизни у онкологических больных.
Эффективность перорального применения ингибитора ЦОГ-2 в комплексной терапии с фосфатом тоцераниба и пероральным циклофосфамидом у собак с диагнозом «рак молочной железы» была доказана на основании выраженных клинических улучшений и повышения показателя медианы выживаемости по сравнению с группой пациентов, получавших монотерапию одним из препаратов.
Есть мнение, что из-за небольшого размера и высокой гидрофильности нестероидные противовоспалительные препараты ограниченно проникают в раковые клетки, однако применение селективных ингибиторов ЦОГ-2 улучшает их проникновение внутрь раковой клетки. В клинических исследованиях было доказано, что длительное использование селективных ингибиторов ЦОГ-2 (коксибов) снижает частоту возникновения некоторых злокачественных новообразований в гуманной медицине, а также повышает эффективность химиотерапии.
В свою очередь, в ветеринарной медицине применение селективных ингибиторов ЦОГ-2 у собак, больных переходно-клеточной карциномой, плоскоклеточным раком и раком молочной железы, продемонстрировало высокую эффективность терапии посредством снижения продукции PGE-2, который ингибирует апоптоз, способствует пролиферации клеток, стимулирует ангиогенез и снижает иммунитет, при этом наблюдалось повышение воспалительных цитокинов Th1.
«Фирококсиб» является ЦОГ-2-специфическим нестероидным противовоспалительным препаратом. В экспериментальном проспективном исследовании на клеточных культурах была подтверждена индукция апоптоза в клеточных линиях собак со злокачественной опухолью молочной железы, предоставив убедительные доказательства проапоптотического эффекта «Фирококсиба» на раковые клетки.
Многие авторы в своих исследованиях отмечают снижение размеров опухоли и выживаемости при комплексной терапии опухолевых патологий «Фирококсиба» в сочетании с тоцеранибфосфатом, «Карбоплатином», «Цисплатином», а также противоопухолевый эффект за счет подавления воспаления при применении «Фирококсиба» в монотерапии при паллиативном лечении у собак.
Некоторые исследования указывают на хорошую переносимость, высокую безопасность и низкий процент выявления побочных эффектов при длительном применении «Фирококсиба» у собак с различными видами новообразований.
Цель работы — изучение влияния «Фирококсиба» в комплексной терапии нерезектабельных сарком мягких тканей с оценкой течения локального воспалительного процесса.
Материалы и методы исследования
Исследование проводили в 2023–2025 гг. на базе кафедры болезней мелких домашних, лабораторных и экзотических животных ФГБОУ ВО «Российский биотехнологический университет (Росбиотех)».
Объектом исследования послужили 40 собак домашнего содержания различной породы, пола и возраста с первичной спонтанной саркомой мягких тканей неопределенного фенотипа в области головы, подтвержденной при патоморфологическом исследовании (цитологически и (или) гистологически). Исследования проводили в соответствии с Директивой от 22 сентября 2010 года № 2010/63/ EU Европейского парламента и Совета Европейского союза о защите животных, используемых в научных целях.
При проведении исследования был использован комплексный методический подход, состоящий из анализа анамнестических данных жизни и болезни животных, проведения клинического осмотра, оценки результатов общего клинического и биохимического анализов крови, а также дополнительных методов визуальной диагностики, включавших рентгенографическое исследование грудной полости и ультрасонографическое исследование брюшной полости, при необходимости магнитно-резонансную томографию (МРТ) и компьютерную томографию (КТ).
Гематологические исследования включали общий клинический и биохимический анализ крови, проводимые с целью выявления количественного состава крови и сопутствующих патологий, а также выбора протоколов лечения. Материал для гематологических исследований — цельная кровь и сыворотка крови. Кровь для анализа брали с соблюдением всех правил подготовки к проведению гематологического исследования, учитывая особенности метаболизма различных видов животных.
Исследование проводили при соблюдении голодной диеты (не менее 12 часов). Кровь получали путем венепункции преимущественно передней подкожной вены предплечья (V. Cephaliса) и латеральной подкожной вены голени (V. saphena lateralis). Для биохимического анализа крови использовали пробирки с активатором свертывания, для клинического анализа крови — пробирки с антикоагулянтом К3 ЭДТА (пробирку заполняли кровью строго до отметки на этикетке). После взятия крови для клинического исследования пробирку осторожно переворачивали не менее 10 раз для перемешивания крови с антикоагулянтом, исследование проводили в течение 30 мин. для снижения вероятности артефактов, связанных с хранением.
Морфологические исследование крови на анализаторе Micro CC-20 Plus (High Technology, Inc., США) по общепринятым методикам. Определяли количество эритроцитов, гемоглобина, гематокрита, лейкоцитов с лейкоцитарной формулой, тромбоцитов, скорость оседания эритроцитов, тромбоцитов. Производили автоматический и ручной подсчет элементов крови при помощи микроскопии мазков крови, окрашенных по Паппенгейму. Для окраски приготовленные подсушенные мазки крови помещали в раствор эозин метиленового синего типа Лейшмана («Минимед-Л», ООО «МиниМед», Россия) на 2–3 мин., затем промывали и помещали в раствор красителя азур-эозин по Романовскому («Минимед-Р», ООО «МиниМед», Россия), приготовленный в соотношении 1:10 на 10–15 мин. После окраски мазок сушили и приступали к микроскопической оценке.
С помощью методов визуальной диагностики определяли локализацию процесса и степень инвазии в окружающие ткани первичного опухолевого очага, оценивали наличие метастазов и определяли стадию процесса, а также проводили морфологическое исследование новообразований для определения тактики лечения.
Окончательный диагноз и степень злокачественности определяли на основании анализа результатов комплексного обследования животного и подтверждения опухолевого процесса посредством морфологического исследования биоптатов для исключения других возможных факторов клинических проявлений патологических состояний.
После верификации сарком мягких тканей в области головы собакам была назначена химиотерапия с применением цитостатического препарата «Карбоплатин» в дозировке от 250 до 300 мг/м2 внутривенно (раз в 3 недели), курс — 4–6 инъекций. Хирургическое лечение у животных не проводили по причине нерезектабельности опухоли (отсутствие возможности соблюдения правил абластики и антибластики) или отсутствия согласия владельцев. Распределение по группам и выбор дозировки «Фирококсиба» проводили с учетом размера и выраженности воспалительной инфильтрации опухолевого очага, а также степени болевого синдрома.
Для оценки боли использовали шкалу, разработанную Центром ветеринарной медицины Университета штата Колорадо (США). В результате были сформированы 4 группы по 10 собак, дозировка фирококсиба — 5, 10 и 15 мг/кг/сут. В 4-й группе животным «Фирококсиб» не назначали, данную группу рассматривали как контрольную (табл. 1).
Для оценки эффективности лечения проводили регулярные осмотры животных, включавшие клиническое обследование животного, визуальную оценку и измерение опухолевого очага, а также клинический анализ крови перед следующим введением «Карбоплатина». Результаты биохимического анализа крови оценивали каждые три месяца.
На основании полученных результатов исследования были сформированы базы данных в программе Excel MS Office. Статистическую обработку проводили в программе Statistica 10.0 (США). Нормальность распределения данных определяли с помощью критерия Шапиро — Уилка, достоверность различий — с помощью параметрического двухстороннего t-критерия Стьюдента, непараметрического U-критерия Манна — Уитни для независимых выборок. Различия между сравниваемыми группами считали достоверными при уровне значимости р < 0,05.
Результаты и обсуждение
При проведении исследования «Фирококсиб» в дозировке 5, 10 и 15 мг/кг/сут являлся препаратом выбора в качестве нестероидного противовоспалительного препарата у животных с предварительным диагнозом и размером опухолевого очага, подходящими для первых трех групп исследования, до постановки окончательного диагноза и после взятия биопсии для цитологического и (или) гистологического исследования. При подтверждении диагноза «саркома мягких тканей неопределенного фенотипа» животным назначали химиотерапевтическое лечение.
При назначении «Фирококсиба» улучшение кинических проявлений отмечали на 3-й и последующие дни: снижение болезненности и зуда, уменьшение и (или) прекращение объема отделяемого, уменьшение степени выраженности воспалительной инфильтрации окружающих тканей. В первые два дня приема препарата выраженного эффекта не отмечалось.
В ходе исследования для оценки динамики лечения и выявления побочных эффектов комплексной терапии проводили повторный общий клинический осмотр животных, уделяя особое внимание зоне патологического процесса с целью определения размера опухоли, наличия очагов некроза тканей, отека, боли (зуда).
Данные о динамике комплексной терапии саркомы мягких тканей представлены в таблице 2.
В первой группе 10 собак с саркомой мягких тканей неопределенного фенотипа в области головы размером до 2 см и отсутствием отдаленного метастазирования проходили политерапию, включающую в себя применение «Фирококсиба» в дозировке 5 мг/кг, «Карбоплатина» — от 250 до 300 мг/м2. У 9 из 10 собак наблюдались частичное уменьшение болевого синдрома и улучшение качества жизни, что позволило увеличить медиану выживаемости до 426 дней от момента постановки окончательного диагноза (рис. 1).
Однако у одной собаки отмечались выраженная прогрессия роста опухоли с ухудшением общего состояния и прогрессирование стадии онкологического процесса из-за появления метастазов, что являлось основанием для проведения гуманной эвтаназии на 59-й день исследования.
Во второй группе животных с окончательным диагнозом «саркома мягких тканей в области головы размером от 2 до 5 см» и отсутствием отдаленного метастазирования была проведена политерапия, включающая применение «Фирококсиба» в дозировке 10 мг/кг и «Карбоплатина» от 250 до 300 мг/м2, а также симптоматическую терапию, направленную на корректировку нейтропении. У 7 из 10 собак наблюдались значительное уменьшение болевого синдрома и улучшение качества жизни, а также снижение роста и прогрессирования злокачественного процесса, что позволило увеличить медиану выживаемости до 292 дней от момента постановки окончательного диагноза. У 3 собак в группе наблюдались прогрессирование онкологического процесса и выявление метастазов. Несмотря на то что применение «Фирококсиба» и «Карбоплатина» привело к улучшению качества жизни в начале терапии, через 52–68 дней новообразования увеличились в размерах больше чем в 2 раза, эффективность применения протокола политерапии значительно снизилась, а качество жизни резко ухудшилось, что явилось основанием для гуманной эвтаназии.
В третьей группе собак размер сарком мягких тканей в области головы составлял более 5 см, отдаленные метастазы на момент назначения лечения выявлены не были. Комплексная терапия включала применение «Фирококсиба» в дозировке 15 мг/кг, «Карбоплатина» — от 250 до 300 мг/м² в зависимости от показателей крови и витальных показателей, а также симптоматическую терапию. В ходе лечения у 9 из 10 собак не наблюдалось роста новообразования, отмечалось уменьшение объема новообразования за счет снижения воспаления: у 7 животных объем новообразования уменьшился значительно, у 2 — в меньшей степени. Медиана выживаемости в группе составила 204 дня. У 1 из 10 собак наблюдались рост новообразования с дальнейшей некротизацией тканей опухолевого очага, прогрессирование онкологического процесса за счет выявления метастазов, ухудшение общего состояния, из-за чего была рекомендована гуманная эвтаназия.
В четвертой группе (контрольной) в качестве лечения у 10 собак применяли «Карбоплатин» в монорежиме в дозировке от 250 до 300 мг/м² в зависимости от показателей крови и витальных показателей. Медиана выживаемости в данной группе составила 173,5 дней, что значительно меньше по сравнению с группами, в которых проводили комбинированное лечение с применением «Фирококсиба» в разных дозировках.
Для оценки общего состояния собак, а также своевременного выявления гематологических нарушений на фоне проведения химиотерапии всем животным проводили гематологическое исследование крови — общий клинический и биохимический анализ. Грубых отклонений при анализе полученных результатов выявлено не было, однако у некоторых пациентов отмечали умеренную нейтропению, что является известным побочным эффектом при применении цитостатических препаратов.
В ходе анализа изменений клинического анализа крови в динамике при проведении поли- и монотерапии установили развитие нейтропении в первой группе у одного животного на 42-й день наблюдения (10,0% случаев от общего количества животных в группе на момент исследования), которая наблюдалась на 90-й и 180-й дни (по 11,1% случаев), однако статистически значимых отклонений по группе выявлено не было.
Во второй группе нейтропению наблюдали у одного животного на 21-й день (10,0% случаев), а также на 42-й (11,1% случаев) и 90-й (14,3% случаев) дни; на 180-й день исследования лейкопения и нейтропения были выявлены у двух животных в группе, что составило 28,6% случаев.
В третьей группе исследуемых собак на 21-й и 42-й дни отмечали нейтропению у 2 животных, что составило 20,0% и 28,6% случаев, соответственно, от количества животных в группе на момент проведения клинического анализа крови; на 90-й и 180-й дни нейтропению наблюдали у 1 собаки, что соответствовало 14,3% и 20,0% случаев.
В четвертой группе собак нейтропению выявляли на 21-й и 42-й дни исследования у одной собаки (10,0% и 11,1% случаев соответственно), на 90-й день — у 2 животных (33,3% случаев), на 180-й день — лейкопению и нейтропению у 3 собак (75,0% случаев).
Динамика изменения гематологических показателей клинического анализа крови животных при проведении исследования представлена в таблице 3.
Стоит отметить хорошую переносимость «Фирококсиба» животными при длительном (более 12 мес.) проведении политерапии. При проведении исследования в группах с применением «Фирококсиба» и «Карбоплатина» наблюдали меньшую выраженность побочных эффектов препаратов в виде рвоты и диареи по сравнению с группой, в которой проводили лечение сарком мягких тканей в области головы «Карбоплатином» в монорежиме.
При применении «Фирококсиба» в исследовании во всех трех группах при повышении дозировки 15 мг/кг/сут было обнаружено повышение эффективности проводимой терапии по сравнению с контрольной группой: снижение объема воспаления, болевого синдрома; выраженный и быстрый рост новообразований не наблюдался.
Выводы
Cочетание «Фирококсиба» (ингибитора ЦОГ-2) с алкилирующим антинеопластическим препаратом «Карбоплатин» повышает противоопухолевую активность по сравнению с контрольной группой, в которой применяли только алкилирующий антинеопластический препарат «Карбоплатин» в монорежиме.
В исследовании продемонстрирована эффективность применения «Фирококсиба» в комбинированной терапии сарком мягких тканей в области головы у собак, которая проявлялась в улучшении качества жизни, а также увеличении продолжительности жизни по сравнению с контрольной группой, подтвержденным данными медианы выживаемости (контрольная группа — 173,5 дня; 1-я группа — 426 дней; 2-я группа — 292 дня; 3-я группа — 204 дня).
Более низкие медианы выживаемости во 2-й и 3-й группах исследования по сравнению с 1-й группой обусловлены особенностями течения заболевания и размерами очага, что учитывалось при формировании групп.
Об авторах
Юлия Николаевна Меликова, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры болезней мелких домашних, лабораторных и экзотических животных
melikovayn@mgupp.ru https://orcid.org/0000-0002-9322-1464
Анастасия Вячеславовна Чечнева, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры болезней мелких домашних, лабораторных и экзотических животных
chechnevaav@mgupp.ru https://orcid.org/0009-0002-4723-1423
Дарья Александровна Вильмис, кандидат ветеринарных наук, доцент кафедры болезней мелких домашних, лабораторных и экзотических животных
vilmisda@mgupp.ru https://orcid.org/0009-0007-0921-627X
Ульяна Андреевна Малюкова, студент
u.malukova@mail.ru https://orcid.org/0009-0002-5198-0785
Российский биотехнологический университет (Росбиотех), Волоколамское шоссе, 11, Москва, 125080, Россия
УДК: 619:616-006-08:636.7
DO:10.32634/0869-8155-2025-396-07-14-22
