Главная страница » Циркуляция вируса гриппа типа А среди вороновых на территории Северного Казахстана

Рубрики

27.12.2024

Циркуляция вируса гриппа типа А среди вороновых на территории Северного Казахстана

Грипп птиц, вызываемый вирусами гриппа типа А, продолжает представлять глобальную угрозу для здравоохранения, птицеводства и дикой фауны. Высокопатогенные штаммы, такие как H5N1 и H5N8, способны вызывать массовую гибель домашних и диких птиц и тяжелые инфекции у людей с летальностью до 60%.

Основным природным резервуаром вируса являются водоплавающие и околоводные птицы, формирующие эпизоотические очаги в местах массовых скоплений на водоемах.

В последние годы отмечается рост заболеваемости гриппом птиц в мире, в том числе с вовлечением новых видов и территорий. Так, в 2020–2022 годах крупные вспышки высокопатогенного гриппа H5N1 и H5N8 были зарегистрированы среди домашних и диких птиц в десятках стран Азии, Европы и Африки. Эти события демонстрируют исключительную изменчивость вируса гриппа и его способность преодолевать межвидовые барьеры.

Своевременное выявление циркуляции вируса среди диких птиц имеет решающее значение для прогнозирования и предотвращения вспышек. Особую роль в этом отношении играют места остановок на путях миграции, где происходят массовое скопление и тесный контакт птиц из разных популяций.

Территория Казахстана, расположенная на стыке Центрально-Азиатского и Западно-Азиатско-Восточно-Африканского пролетных путей, занимает ключевое место в системе глобального эпизоотологического мониторинга гриппа птиц.

Среди разнообразия дикой орнитофауны Казахстана особый интерес представляют птицы семейства врановых (или вороновых) (Corvidae), являющиеся важными носителями и переносчиками вируса гриппа. Будучи многочисленными синантропными видами, грачи (Corvus frugilegus) и серые вороны (Corvus cornix) образуют крупные скопления вблизи населенных пунктов и сельскохозяйственных объектов, что создает благоприятные условия для циркуляции и распространения вируса.

Несмотря на очевидную актуальность, циркуляция вируса гриппа А среди вороновых птиц в Казахстане остается недостаточно изученной. Большинство предыдущих исследований были сфокусированы на водоплавающих и околоводных птицах, в то время как данные по вороновым фрагментарны и не позволяют составить целостную картину эпизоотической ситуации.

Настоящая работа направлена на изучение распространенности вируса гриппа А среди грачей и серых ворон в северных и центральных регионах Казахстана по данным осеннего мониторинга 2023 года. Полученные результаты призваны заполнить пробелы в понимании роли вороновых в циркуляции вируса и способствовать оптимизации системы эпизоотологического надзора за гриппом птиц в республике.

Материалы и методы исследования

В сентябре 2023 года в ходе полевых экспедиций были собраны образцы от 33 птиц семейства врановых (Corvidae) в Костанайской, Акмолинской и Жамбылской областях Казахстана. Выборка включала 28 грачей (Corvus frugilegus) и 5 серых ворон (Corvus cornix), отловленных в природных и синантропных биотопах (табл. 1).

Отбор птиц проводился методом ружейной охоты с соблюдением ветеринарно-санитарных правил. От каждой птицы брали парные образцы из трахеи и клоаки в объеме 1–2 мл каждый. Пробы собирали в криопробирки с 3 мл транспортной среды на основе фосфатно-солевого буфера и антибиотиков. Образцы замораживали в жидком азоте и транспортировали в лабораторию в термоконтейнерах при температуре -70 °C.

Выявление РНК вируса гриппа А проводили методом ОТ-ПЦР в реальном времени с использованием праймеров к консервативному участку гена М по протоколу ВОЗ.

Для экстракции вирусной РНК использовали набор QIAamp Viral Mini Kit (Qiagen, Германия) согласно инструкции производителя. ОТ-ПЦР ставили на приборе RotorGene Q (Qiagen) по следующей программе: 50 °C — 30 мин., 95 °C — 15 мин., затем 45 циклов 95 °C — 10 сек и 60 °C — 30 сек. Положительным считали образец со значением порогового цикла (Ct) менее 35.

Доли положительных образцов рассчитывали в программе Epitools (США) с определением 95% доверительных интервалов методом Уилсона. Сравнение частот между областями и типами образцов проводили с помощью точного критерия Фишера. За статистически значимый принимали уровень p < 0,05.

Результаты

В общей сложности методом ОТ-ПЦР вирус гриппа А был выявлен в 4 из 66 исследованных проб (6,1%, 95% ДИ 2,4–14,6%). Все положительные находки получены от грачей в Костанайской (3 из 10, 30,0%) и Акмолинской областях (1 из 6, 16,7%). В Жамбылской области, где были собраны 17 проб от грачей, все образцы оказались отрицательными (табл. 1).

Частота обнаружения вируса у грачей составила 30,0% (3/10) в Костанайской области и 16,7% (1/6) в Акмолинской. Различия статистически незначимы (p = 0,604). Среди серых ворон положительных находок не зарегистрировано.

Суммарная доля инфицированных особей была выше в Костанайской области (15%, 3/20), чем в Акмолинской (8,3%, 1/12) и Жамбылской (0%, 0/34), однако различия не достигали порога значимости (p = 0,120 и p = 0,086 соответственно). Трахеальные и клоакальные образцы продемонстрировали сходный уровень выявляемости вируса — 3,0% (1/33) и 9,1% (3/33) соответственно (p = 0,600). Коинфекция верхних и нижних дыхательных путей отмечена у одной птицы в Костанайской области, тогда как у остальных вирус обнаруживался либо в клоакальном, либо в трахеальном смыве.

Средние значения Ct в положительных пробах варьировали от 28,5 до 33,6 (медиана 31,9), что свидетельствует о невысокой концентрации вирусной РНК. У птицы с коинфекцией уровень накопления вируса был выше в клоакальной пробе (Ct = 28,5), чем в трахеальной (Ct = 31,4).

Статистический анализ связи значений Ct с видом птиц, областью сбора и типом образца не выявил значимых различий и корреляций, что, вероятно, обусловлено малым числом позитивных находок (табл. 2).

Полученные результаты подтверждают циркуляцию вируса гриппа А среди грачей в северных и центральных регионах Казахстана в осенний период 2023 года. Отсутствие выявлений в Жамбылской области, вероятно, связано с недостаточным объемом выборки и не исключает возможности спорадических случаев инфицирования.

Преобладание клоакальных находок над трахеальными согласуется с данными литературы о преимущественной репродукции вируса в кишечнике у диких птиц. Обращает на себя внимание сравнительно низкий уровень инфицированности вороновых (6,1%) в целом по выборке, 15–30% — среди положительных популяций. Для сравнения: в предыдущих исследованиях частота выявления вируса гриппа у диких птиц в Казахстане достигала 10–20%, а среди вороновых в соседних странах — 5–15%. Вероятно, это отражает межпопуляционную и сезонную вариабельность эпизоотического процесса, зависящую от кормовой базы, погодно-климатических условий и путей миграции.

Нельзя исключать, что истинная распространенность инфекции среди вороновых несколько выше выявленной, учитывая невысокую чувствительность ОТ-ПЦР при низких концентрациях вируса.

Включение в протокол исследований вирусологических методов (заражение куриных эмбрионов, клеточных культур) позволило бы повысить выявляемость в 1,5–2 раза, однако это сопряжено со значительными трудозатратами и удорожанием работ.

Выводы

Результаты осеннего мониторинга 2023 года выявили циркуляцию вируса гриппа А у 6,1% исследованных вороновых птиц в северных и центральных регионах Казахстана. Наибольшая частота инфицирования отмечена среди грачей в Костанайской (30,0%) и Акмолинской (16,7%) областях, в то время как серые вороны и птицы из Жамбылской области оказались свободны от вируса. Трахеальные и клоакальные пробы продемонстрировали сходный уровень выявляемости (3,0% и 9,1% соответственно) при невысоких концентрациях вирусной РНК (Ct 28,5–33,6).

Полученные данные существенно дополняют и расширяют представления о роли вороновых птиц в циркуляции вируса гриппа А на территории Казахстана. Впервые показано наличие вируса среди грачей в регионах, прилегающих к Центрально-Азиатскому пролетному пути, что подчеркивает их потенциальное эпидемическое значение как связующего звена между мигрирующими и оседлыми популяциями птиц.

В то же время сравнительно невысокий уровень инфицированности (6,1% в целом по выборке) указывает на спорадический характер циркуляции и отсутствие выраженного эпизоотического неблагополучия на момент исследования.

Данная работа вносит вклад в понимание закономерностей эпизоотического процесса гриппа птиц в условиях Казахстана и сопредельных стран Центральной Азии. Продемонстрирована принципиальная возможность выявления вируса у вороновых птиц стандартными молекулярными методами, что открывает перспективы для их более широкого включения в программы эпизоотологического мониторинга.

Сопоставление данных по разным областям, видам птиц и типам образцов позволяет предполагать наличие региональных, популяционных и индивидуальных различий в динамике эпизоотического процесса, требующих углубленного изучения.

Дальнейшие исследования должны быть направлены на расширение географии и таксономического охвата эпизоотологического мониторинга гриппа среди вороновых птиц в Казахстане и сопредельных странах.

Особого внимания заслуживают зоны повышенного эпизоотического риска — места зимовок, гнездовий, остановок на пролете, где создаются условия для интенсивной циркуляции и реассортации вирусов между популяциями диких и домашних птиц. Параллельно должна вестись работа по изоляции и генетической характеристике вирусов гриппа от вороновых с оценкой их эпидемического и эпизоотического потенциала.

Об авторах

Ербол Досанович Бурашев; кандидат ветеринарных наук

yerbol.burashev@biosafety.kz; https://orcid.org/0000-0002-4701-1992

Мухит Бармакулы Орынбаев; кандидат ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент Национальной академии наук Республики Казахстан, главный научный сотрудник

omb65@mail.ru; https://orcid.org 0000-0002-5882-4964

Куляйсан Турлыбаевна Султанкулова; кандидат биологических наук, профессор, заведующая лабораторией

sultankul70@mail.ru; https://orcid.org 0000-0002-1332-1247

Замира Даулеткызы Омарова; научный сотрудник

zarina-omarova-80@mail.ru; https://orcid.org 0000-0003-4215-2638

Али Бакытжанович Тулендибаев; научный сотрудник

tulendibaev93@mail.ru; https://orcid.org 0000-0001-7741-0938

Тахмина Уразбековна Аргимбаева; научный сотрудник

98.constantine.98@gmail.com; https://orcid.org 0000-0002-5656-0678

Нурдос Аманжанович Аубакир; младший научный сотрудник

nurdos.aubakirov@mail.ru; https://orcid.org 0000-0003-0878-9168

Танат Талайбекович Ермекбай; младший научный сотрудник